世界衛(wèi)生組織1月15日發(fā)布的最新報(bào)告顯示，在西非受埃博拉疫情影響最嚴(yán)重的3個(gè)國家中，感染病例增速在前幾周開始出現(xiàn)明顯的放緩趨勢。報(bào)告稱這是一個(gè)樂觀的信號(hào)。

　　全球都在為抗擊埃博拉疫情奮戰(zhàn)，每一分努力，都是為了成就一份生命的希望。在我國，去年11月25日，國家食品藥品監(jiān)督管理總局正式批準(zhǔn)了我國首批3家企業(yè)的埃博拉病毒檢測試劑產(chǎn)品投入疫情防控。其中，來自深圳市桃花源科技創(chuàng)新園的深圳市普瑞康生物技術(shù)有限公司因在埃博拉疫情面前的快速應(yīng)急反應(yīng)以及病毒檢測100%的準(zhǔn)確率，引起了國內(nèi)外的廣泛關(guān)注。

　　面對(duì)如此“猙獰的”病毒，遠(yuǎn)離疫區(qū)的中國醫(yī)學(xué)家們，是怎樣在埃博拉病毒檢測能力上實(shí)現(xiàn)歷史性的突破？

　　埃博拉病毒形似中國古代的“如意”，呈現(xiàn)一般纖維病毒的線形結(jié)構(gòu)，屬絲狀病毒科。據(jù)介紹，本次造成疫情的扎伊爾埃博拉病毒的致死率最高可達(dá)90%。病毒潛伏期長、早期癥狀不明顯，且目前尚未有有效的疫苗和藥物，只能對(duì)疫情進(jìn)行防控。

　　“埃博拉病毒和其他病毒一樣，有自己獨(dú)特的一段DNA片段，就像一個(gè)數(shù)字序列號(hào)。這也是它的一個(gè)‘身份證’。檢測埃博拉病毒時(shí)，只要找到這段DNA片段，通過我們自主研發(fā)的熒光PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）復(fù)合探針技術(shù)，就能準(zhǔn)確對(duì)病毒進(jìn)行辨識(shí)?！睋?jù)普瑞康公司總經(jīng)理助理吳旭介紹。

　　2014年4月2日至15日，根據(jù)埃博拉病毒的靶基因，普瑞康很快設(shè)計(jì)出十幾對(duì)引物探針并構(gòu)建假病毒。通過檢測假病毒對(duì)引物、探針進(jìn)行篩選和優(yōu)化，僅用半個(gè)月時(shí)間，普瑞康就確定了PCR反應(yīng)體系及建立企業(yè)參考品。5月4日至6日，普瑞康即生產(chǎn)出埃博拉病毒試劑盒樣品。

　　“項(xiàng)目過程中的關(guān)鍵問題在于樣本的來源問題。由于埃博拉病毒自身具有很高的傳染性和致死率，在我國國內(nèi)又沒有爆發(fā)過，這也使得我們沒有任何真實(shí)的病毒來源。因此科研樣本的來源成為影響課題進(jìn)展的重要障礙?！逼杖鹂倒狙邪l(fā)部研發(fā)總監(jiān)孫曉彥博士指出。

　　2014年5月7日至26日，研究團(tuán)隊(duì)展開埃博拉病毒試劑盒性能的研究，包括靈敏度分析、特異性分析、干擾物評(píng)估、穩(wěn)定性研究以及不同機(jī)型檢測性能評(píng)估。

　　“科技攻關(guān)離不開技術(shù)創(chuàng)新?！睂O曉彥表示，此次埃博拉病毒檢測試驗(yàn)與生物信息學(xué)技術(shù)相結(jié)合，進(jìn)行了虛擬試驗(yàn)。通過NCBI等生物信息學(xué)網(wǎng)絡(luò)資源，分析和下載數(shù)量足夠的埃博拉核酸序列，利用多個(gè)生物信息學(xué)軟件對(duì)這些序列進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)其中較為保守的區(qū)域，然后把這些區(qū)域與其他病毒進(jìn)行比較尋找其中較特異的序列，設(shè)計(jì)引物，以電子克隆的方式考察可能進(jìn)行反應(yīng)的特異性和擴(kuò)增能力。

　　據(jù)孫曉彥介紹，由于國內(nèi)沒有樣本，必須先構(gòu)建可以利用的假病毒來代替樣本進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)。于是研究團(tuán)隊(duì)通過DNA合成，連接酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)等技術(shù)進(jìn)行分離、篩選、拼接、合成目的片段的DNA片段，通過測序驗(yàn)證以后，將其連接到載體上，然后將其導(dǎo)入膜外殼中，構(gòu)建含有擴(kuò)增片段區(qū)域序列的不具有感染能力的埃博拉病毒樣顆粒。由于其在結(jié)構(gòu)和基質(zhì)上和病毒樣本接近，并且含有擴(kuò)增片段，因此可以部分代替相關(guān)病毒，對(duì)試劑盒的反應(yīng)條件、分析性能進(jìn)行相應(yīng)的評(píng)估。

　　“埃博拉出血熱的早期癥狀跟感冒十分相似，都會(huì)發(fā)熱。我們先后聯(lián)系了解放軍疾病預(yù)防與控制所等部門，通過他們的協(xié)助，檢驗(yàn)了試劑盒對(duì)于具有埃博拉出血熱相似癥狀病人的臨床樣本的特異性和抗干擾能力?！睂O曉彥說，“然后，我們和中國援助塞拉里昂醫(yī)療檢測隊(duì)聯(lián)系，通過他們的幫助我們檢測了353例臨床標(biāo)本，其中142例臨床標(biāo)本以中國援助塞拉利昂醫(yī)療檢測隊(duì)根據(jù)WHO公布的引物探針序列自行合成配制的試劑為對(duì)照試劑，無一漏檢。”

　　2014年8月19日，普瑞康生物與軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射與輻射醫(yī)學(xué)研究所共同研發(fā)的“埃博拉病毒核酸檢測試劑盒”通過總后勤部衛(wèi)生部專家評(píng)審，并獲得正式生產(chǎn)批文，成為第一家獲得權(quán)威部門頒發(fā)埃博拉病毒檢測試劑產(chǎn)品生產(chǎn)批文的企業(yè)。

　　檢測總量破千例、日檢測量過百例，是衡量實(shí)驗(yàn)室能力高低和規(guī)模大小的重要指標(biāo)，創(chuàng)造了多個(gè)“歷史第一”，這標(biāo)志著中國實(shí)驗(yàn)室能力水平已躋身世界先進(jìn)行列

　　盡管研究團(tuán)隊(duì)通過模擬病毒的方式研發(fā)出“埃博拉病毒核酸檢測試劑盒”，但還沒有經(jīng)過“真槍實(shí)彈”的臨床考核。2014年9月16日，中國政府派出中國疾病預(yù)防控制中心移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室檢測隊(duì)，赴塞拉利昂開展埃博拉出血熱檢測工作，普瑞康的“埃博拉病毒核酸檢測試劑盒”也被隨行帶往展開考核。

　　中國疾病預(yù)防控制中心移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室檢測隊(duì)抵達(dá)非洲后，首次接觸到5份埃博拉送檢樣本。經(jīng)中方實(shí)驗(yàn)室檢測，5份可能感染埃博拉病毒的樣本中有4份結(jié)果呈陽性、1份呈陰性。這與樣本提供方——南非駐塞拉利昂的拉卡實(shí)驗(yàn)室的原始檢測記錄結(jié)果相一致。為確保檢測結(jié)果準(zhǔn)確，中方實(shí)驗(yàn)室先后采取4種方法進(jìn)行檢測與復(fù)檢，檢測結(jié)果前后完全一致。

　　中國疾病預(yù)防控制中心副主任高福指出，此次樣本測評(píng)驗(yàn)證了中方實(shí)驗(yàn)室的檢測能力，首次證明中國疾控、科研、企業(yè)研制的試劑盒和檢測方法具有很好的特異性和靈敏性。這也是中國第一次嘗試進(jìn)行埃博拉病毒檢測，結(jié)果準(zhǔn)確率達(dá)到100%，第一次“國際大考”獲得通過。

　　據(jù)吳旭介紹，目前世界各國對(duì)于病毒檢測多以生化或免疫的方式，但這都需要病人發(fā)病后方能檢測并確診。由于埃博拉病毒發(fā)病后傳染性極強(qiáng)，這些檢測方式對(duì)于疫情防控作用十分有限。而普瑞康則是采用分子檢測，即通過DNA進(jìn)行病毒辨識(shí)的方式。一旦病人感染埃博拉病毒，即便仍在潛伏期，依然能夠精準(zhǔn)檢測出來，從而做到對(duì)病情的早發(fā)現(xiàn)、早隔離、早治療，對(duì)于整體疫情防控意義重大。

　　值得一提的是，為了更好地配合埃博拉病毒檢測工作，我國還提供了中國移動(dòng)檢測實(shí)驗(yàn)室隨同檢測隊(duì)一同運(yùn)抵非洲。這臺(tái)位于中塞友好醫(yī)院的移動(dòng)P3實(shí)驗(yàn)室由3臺(tái)獨(dú)立方艙組成，包括主艙、輔艙和中控指揮艙，內(nèi)部設(shè)備包括手套箱隔離器、生物安全柜、自控充氣式氣囊門、自潔凈型傳遞窗、高壓污物滅菌器、高效充氣過濾器、高溫污水煮沸罐等。實(shí)驗(yàn)室按照“四流”(人流、物流、氣流、水流)控制理念，實(shí)現(xiàn)了對(duì)“三廢”(廢水、廢氣、廢物)的無害化處理。這個(gè)實(shí)驗(yàn)室也可謂是中國生物安全防控10年發(fā)展成就的縮影。

　　據(jù)中國疾病預(yù)防控制中心赴塞拉利昂移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室檢測隊(duì)隊(duì)長錢軍介紹，隊(duì)員們平均每天工作時(shí)間長達(dá)12小時(shí)以上，對(duì)每個(gè)樣本檢測都要用我國獨(dú)立研制的試劑盒進(jìn)行重復(fù)檢驗(yàn)，確保結(jié)果準(zhǔn)確無誤。移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室截至目前無一起機(jī)械事故發(fā)生，穩(wěn)定性、安全性、可靠性經(jīng)受住了實(shí)戰(zhàn)考驗(yàn)。

　　2014年9月28日，中國疾控中心駐塞拉利昂移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室正式接收塞拉利昂衛(wèi)生部送來的首批24例樣本，第一次批量檢樣就超過出國前擬定的每天20例的目標(biāo)。10月23日，中國、南非、美國、加拿大四國援塞實(shí)驗(yàn)室的埃博拉樣本總檢測量180例，中國實(shí)驗(yàn)室以69例樣本檢測量居四國之首，在埃博拉病毒檢測能力上實(shí)現(xiàn)歷史性突破。10月31日，中國實(shí)驗(yàn)室檢測樣本106例，其中陽性61例，單日檢測量突破百例，檢測總量破千例。截至11月7日，該實(shí)驗(yàn)室已完成埃博拉樣本檢測1435例，占塞拉利昂9月28日以來總樣本量的四分之一，其中陽性樣本量759例，占同期該國檢出陽性樣本的30％左右。這標(biāo)志著中國實(shí)驗(yàn)室能力水平已躋身世界先進(jìn)行列。

　　“由于我們的高檢測準(zhǔn)確率，目前塞方已十分信任我們的檢測技術(shù)?！眳切裾f，“截至2014年底，我們已通過檢測隊(duì)向西非捐贈(zèng)了1.2萬人份、價(jià)值120萬元的埃博拉病毒核酸檢測試劑盒。”經(jīng)過不斷優(yōu)化檢測流程、大幅提高檢測效率和質(zhì)量，中國疾控中心駐塞拉利昂移動(dòng)實(shí)驗(yàn)室檢測隊(duì)現(xiàn)已成為塞拉利昂埃博拉疫情防控的重要力量。